AFLP差异片段的回收和克隆分析技术服务
AFLP分析:5%变性聚丙烯酸胺凝胶电泳。AFLP多态性片段的回收及克隆:电泳结束后,切取目的条带进行克隆。测序:3730XL进行测序,并在NCBI网站上进行比对分析。
凝胶迁移技术
方法:同位素32P标记探针/生物素/荧光素标记/进行检测。技术要点:实验过程包括核蛋白的提取,同位素标记/生物素/荧光素标记/与纯化,凝胶电泳,胶片暴光等。在EMSA操作中会用到同位素,要注意实验室环境和实验员的保护。
芹菜细菌性软腐病菌鉴定
首先对芹菜软腐组织分离菌株,而后进行特异性PCR、ITS-RFLP带型以及基于16S rDNA完整序列遗传关系分析等,即可鉴定芹菜细菌性软腐病菌。
毒麦鉴定
对毒麦及其近似种的ITS2序列进行扩增测序,再根据序列比对得到的多态性位点,设计特异性引物及Taqman-MGB探针,建立Real-time PCR,而后对特异性、灵敏度、重复性进行系统构建。
竹花叶病毒的RT-PCR法检测
根据GenBank上报道的BaMV和其伴随卫星RNA(satBaMV)序列分别设计特异性引物,优化RT-PCR条件,建立BaMV的RT-PCR检测方法
甲基化PCR技术
原理DNA甲基化是一种表观遗传修饰,它是由DNA甲基转移酶(DNA methyl-transferase, Dnmt)催化S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体,将胞嘧啶转变为5-甲基胞嘧啶(mC)的一种反应,在真核生物DNA中,5-甲基胞嘧啶是唯一存在的化学性修饰碱基。CG二核苷酸是最主要的甲基